第四章 常用药材分析与检测
人参
GINSENG RADIX ET RHIZOMA
人参为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。主产于吉林、辽宁、黑龙江。野生者名“山参”；栽培者称“园参”；播种在山林野生状态下自然生长的称“林下参”，习称“籽海”。园参一般应栽培6～7年后收获。鲜参洗净后干燥者称“生晒参”；蒸制后干燥者称“红参”；加工断下的细根称“参须”。山参经晒干称“生晒山参”。多于秋季采挖，洗净经晒干或烘干。其性微温，味甘、微苦。具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，安神的功效[1，2]。
【主要成分】
（1）三萜皂苷类 人参皂苷（ginsenoside），多数为达玛烷型四环三萜皂苷，如人参皂苷Ra1、人参皂苷Ra2、人参皂苷Ra3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh1及20-葡萄糖基-人参皂苷Rf等；少数为齐墩果酸型（C型）皂苷，如人参皂苷Ro。由于苷元不同，达玛烷型皂苷又分为20（S）-原人参二醇型皂苷（A型）和20（S）-原人参三醇型皂苷（B型），以前一类型较多。
（2）挥发性成分 β-榄香烯、β-金合欢烯、α-愈创木烯、蛇麻烯、艾里莫欢烯、β-广藿香烯、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚、十七烷醇-1、人参炔醇、人参环氧炔醇等。
（3）多糖类 人参淀粉和人参果胶两部分组成，具显著生理活性的主要是人参果胶。人参果胶中有两种酸性杂多糖SA与SB。
【定性分析】
（1）取粉末0.5g，加乙醇5mL，振摇，过滤；滤液少量置蒸发皿中蒸干，滴加三氯化锑三氯甲烷饱和溶液，蒸干显紫色（甾萜类反应）。
（2）取本品粉末1g，加三氯甲烷40mL，加热回流1h，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水0.5mL拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇10mL，超声处理30min，吸取上清液，加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf及人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1mL各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各1～2μL，分别点于同一硅胶G薄层板（厚500μm）上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15:40:22:10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点；在与色谱相应的位置上，日光下显相同的三个紫红色斑点，紫外光灯（365nm）下，显相同的一个黄色和两个橙色荧光斑点。
【含量测定】 人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1（高效液相色谱法）
（1）色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱（检测波长为203nm，理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000）。
（2）对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品及人参皂苷Rb1对照品，加甲醇制成每1mL中各含0.2mg的混合溶液，摇匀，即得。
（3）供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约1g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加热回流3h，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒移入100mL锥形瓶中，精密加水饱和正丁醇50mL，密塞，放置过夜，超声处理（功率250W，频率50k Hz） 30min，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25mL，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
（4）测定法 分别精密吸取对照品溶液10μL与供试品溶液10～20μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，含人参皂苷Rg1（C42H72O14）和人参皂苷Re（C48H82O18）的总量不得少于0.30％，人参皂苷Rb1（C54H92O23）不得少于0.20％。
【现代研究】
张翠英等[3]采用超高效液相色谱（UPLC）法研究人参药材皂苷类成分。方法：ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（50mm×2.1mm ID，1.7μm），流动相为乙腈-水，梯度洗脱，流速0.3mL/min，检测波长203nm；在特征图谱中有15个共有指纹峰，并定性了其中9个色谱峰。
袁斌等[4]采用快速溶剂萃取（ASE）-液相色谱法测定人参皂苷Re、Rg1和Rb1等。方法：用三氯甲烷脱脂，水饱和正丁醇提取人参皂苷；C18色谱柱，柱温35℃，流动相为乙腈-水，梯度洗脱，检测波长203nm。
刘芳芳等[5]采用薄层扫描法测定红参中人参皂苷Re的含量。以甲醇超声提取皂苷，硅胶G板点样后薄层扫描（λS=550nm，λR=650nm）；测得红参中人参皂苷Re的含量为0.19％，葛根人参中的含量为0.21％。
赵亚等[6]比较了超微粉碎的粉碎度、提取温度、提取时间、乙醇体积分数等因素对参须中人参总皂苷溶出的影响。利用响应曲面法对3个主要因素即超微粉碎时间、乙醇体积分数和提取时间进行优化，得最佳工艺参数为：超微粉碎时间为9min，70％乙醇，提取时间70min，提取温度50℃，人参总皂苷平均溶出率为94.81％，接近模型预测值。
宋利华等[7]以多糖和糖醛酸提取率与相对分子质量为指标，比较不同提取方法（水提、酸提和碱提）的提取人参多糖效果，经正交试验得最佳提取工艺为：15倍量水，100℃水浴，提取时间3h，提取3次。
佟鹤芳等[8]对比研究了人参和西洋参的挥发性成分。方法：采用水蒸气蒸馏法、索氏提取法、固相微萃取法和吹扫捕集法分别得到人参和西洋参挥发性成分，GC-MS分离与检测，总离子流图通过NIST谱库检索并结合保留指数（Kovats’RI）分析和鉴定具体化学成分。结果：4种方法提取的2种中药的挥发性气味、成分、种类和含量均有差异，同一提取方法条件下得到的人参和西洋参亦具有各自的特征性成分，水蒸气蒸馏共鉴定人参、西洋参样品萜类化合物分别为42个、28个；索氏提取共鉴定人参、西洋参样品萜类化合物分别为26个、15个；固相微萃取共鉴定人参、西洋参样品萜类化合物分别为18个、5个；吹扫捕集共鉴定人参、西洋参样品萜类化合物分别为2个、4个。
【参考文献】
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部［S］.北京：中国医药科技出版社，2015：8.
［2］康廷国.中药鉴定学［M］.北京：中国中医药出版社，2012：123.
［3］张翠英，董梁，陈士林等.人参药材皂苷类成分UPLC特征图谱的质量评价方法［J］.药学学报，2010，45（10）：1296-1300.
［4］袁斌，车金水，金燕等.快速溶剂萃取-液相色谱法测定人参药材中人参皂苷的含量［J］.药物分析杂志，2013，33（7）：1267-1270.
［5］刘芳芳，何晶晶，郑毅男等.薄层扫描法比较红参及葛根人参中人参皂苷Re的含量［J］.人参研究，2012（3）：16-17.
［6］赵亚，赖小平，姚海燕等.响应曲面优化超微粉碎参须中人参总皂苷的溶出工艺［J］.中药材，2014，37（3）：494-498.
［7］宋利华，萧伟，鹿丽丽等.正交试验优选人参多糖的提取工艺［J］.中草药，2012，43（2）：283-287.
［8］佟鹤芳，薛健，童燕玲等.人参和西洋参特有挥发性成分鉴别［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19（21）：120-122.
（方艳夕）