中药分析与检测
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车前子

PLANTAGINIS SEMEN

本品为车前科植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥成熟种子。夏、秋二季种子成熟时采收果穗,晒干,搓出种子,除去杂质。其性味甘,微寒。具有清热利尿,渗湿通淋,明目,祛痰的功能[1]

【主要成分】 主要含黏液质、琥珀酸、二氢黄酮苷、车前烯醇、腺嘌呤、胆碱、车前子碱、脂肪油、维生素A、维生素B等。

【定性分析】

(1)取本品粗粉1g,加甲醇10mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2mL使溶解,作为供试品溶液。另取京尼平苷酸和毛蕊花苷对照品,加甲醇分别制成每1mL各含1mg的溶液,作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各5μL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水(18:2:1.5:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。喷以0.5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

(2)膨胀度 取本品1g,称定重量,照膨胀度测定法[2]测定,应不低于4.0。

【含量测定】 京尼平苷酸、毛蕊花苷[1](高效液相色谱法)

(1)色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,以0.5%乙酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为254nm;柱温30℃。理论板数按京尼平苷酸峰计算应不低于3000。

(2)对照品溶液的制备 取京尼平苷酸、毛蕊花苷对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加60%甲醇制成每1mL各含0.1mg的混合溶液,即得。

(3)供试品溶液的制备 取本品粗粉(过二号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60%甲醇50mL,称定重量,加热回流2h,放冷,再称定重量,用60%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

(4)测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品按干燥品计算,含京尼平苷酸(C16H22O10)不得少于0.50%,毛蕊花苷(C29H36O15)不得少于0.40%。

【现代研究】

车前子检测指标性成分主要是环烯醚砧类成分京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷;苯乙醇类成分毛蕊花糖苷和异毛蕊花苷;黄酮类成分车前子苷等[2]

龚卉卉等[3]应用扫描电镜技术,观察车前子及其易混伪品在种皮表面纹饰与长短径上均有明显差异。

郭丹等[4]建立以高效毛细管电泳结合聚合酶链式反应(PCR)鉴别南葶苈子与车前子的方法,二者的电泳色谱图存在较大差异,容易区分。

王隶书等[5]采用色谱柱:Spherigel C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-1%乙酸溶液(10:15:75),流速1mL/min,检测波长:254nm,柱温30℃。毛蕊花糖苷在0.1936~3.0976μg范围内线性关系良好。

邱倬星等[6]建立一种同步测定车前子京尼平苷酸与毛蕊花糖苷含量的HPLC方法。色谱柱为Hypersil ODS2C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流速1.0mL/min,检测波长254nm,柱温30℃。京尼平苷酸与毛蕊花糖苷的线性范围分别为0.191~1.910μg和0.2002~2.002μg。

何新荣等[7]建立车前子药材高效液相色谱指纹图谱并测定京尼平苷酸和毛蕊花糖苷2种指标成分含量的方法。ZORBAXSB-Ag-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温30℃,体积流量1.0mL/min,检测波长254nm;以乙腈(A)-0.5%乙酸水(B)为流动相,梯度洗脱0~10min,90%B,10~20min,80%B,20~50min,20%B,50~60min,10%B。车前子HPLC指纹图谱,确立13个共有峰,京尼平苷酸和毛蕊花糖苷质量分数均值为0.7943%和0.6642%。

陈永新等[8]采用GC-MS对车前子石油醚提取物检测鉴定出42种化合物,主要脂肪酸成分为亚麻酸、亚油酸、芥子酸、14-甲基十五烷酸甲酯、2-己烷基环丙烷辛酸、2-己烷基环丙烷癸酸等。