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第一节 真菌检查
1.采集标本
浅部真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂等,深部真菌的标本有痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织等。采集时应注意无菌操作。正确的采集方法对检验结果至关重要,具体为:以钝刀划取皮损边缘的鳞屑;先清除病甲表面游离的污物,取甲板下方靠近甲床上部的甲屑;直接用棉拭子取浓汁、渗出物和各种分泌物;以镊子拔取无光泽或有菌鞘的病甲或断甲;对于尿液、腹水、脑脊液,应离心后取沉淀;若怀疑放线菌病,应寻找硫黄样颗粒。
2.检查方法
主要包括直接涂片和培养检查。
(1)直接涂片:
系快速简单而重要的诊断方法。具体为:取标本置玻片上,加一滴10% KOH溶液,盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热溶解角质后,轻轻加压盖玻片使标本透明,即可镜检。该方法用于检查有无菌丝或孢子,但常不能确定菌种(图5-1)。
(2)培养检查:
标本接种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基(sabouraud agar)上,置室温或37℃培养1~3周,必要时可行玻片小培养协助鉴定。菌种鉴定常根据菌落的形态及显微镜下形态判断,对某些真菌,有时尚需配合其他鉴别培养基、生化反应、分子生物学方法确定。该方法的特点是真菌检出率高,并能确定菌种,不足之处,该检查常需要较长时间(图5-2)。
图5-1 真菌镜检
图5-2 真菌培养