血友病A必须与血管性血友病（von willebrand disease，vWD）和获得性血友病（acquired hemophilia，AH）相鉴别。

血管性血友病（vWD）的发生与FⅧ在体内的载体von Willebrand因子（vWF）缺乏有关。在vWD患者中，FⅧ的合成虽然是正常的，但是由于它的载体vWF水平下降而使FⅧ在体内的半衰期缩短。因此，vWD患者的FⅧ水平也下降，虽然下降的幅度在不同患者中可能存在较大的差异。vWD与血友病A鉴别的实验室检查有出血时间（BT）延长或阿司匹林耐量试验阳性、vWF抗原水平下降、瑞斯托霉素诱导的血小板聚集下降等（详见第六章）。

获得性血友病（AH）是指由于体内产生抑制FⅧ的特异性自身抗体而引起的出血性疾病，其出血的临床表现与血友病A基本相同，但是出血程度往往较重。本病最多见于60～80岁老年人，其次为产后女性，儿童罕见，约50%患者既往身体健康。实验室检查方面，常用复钙交叉试验（CRT）或APTT交叉试验作为排除AH的筛选试验。CRT：若延长的复钙时间可以被1/10体积的正常人混合血浆所纠正，说明患者有内源性凝血途径凝血因子（因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ）缺陷；若延长的复钙时间不能被等量的正常人混合血浆所纠正，说明患者血液中含有病理性的抗凝物质。APTT交叉试验：当内源性凝血途径凝血因子缺乏时，正常血浆与患者血浆等量混合可纠正延长的APTT；但当有抗体存在时，等量血浆混合后延长的APTT不能得到纠正。一旦确定存在自身抗体，就应对抗体进行定量以评估出血的严重程度和危险性，常用方法是Bethesda法。