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第四节 抗体筛查与鉴定的结果分析
一、与谱细胞反应格局清晰
从反应格局中确定为单一抗体或无法确定为单一抗体时,可用排除法限定抗体特异性范围,并用吸收放散方法分离各种特异性抗体。当使用吸收放散法不能将抗体分离时,可考虑是否存在联合抗体或类特异性抗体。
二、与谱细胞呈弱反应,结果不明确
1.分析结果
(1)是否符合剂量效应。
(2)是否可能是某些具有个体差异抗原的抗体。
(3)谱细胞是否新鲜无溶血,浓度是否一致。
(4)抗原在每一个红细胞上表现出的抗原强度是否有差异,例P1、Vel。
2.改变实验方法
(1)采用更为灵敏的方法重复实验。
(2)适当增加血清与红细胞比例,适当增加孵育时间。
(3)使用增强剂后重复实验(如PEG)。
(4)酶处理谱细胞后重复实验。
(5)改变pH及反应温度。
(6)使用化学药品破坏某些抗原。
(7)使用血型物质吸附干扰(如P1、Lewis、H等血型物质)。
三、不规则抗体筛查阳性,抗体特异性难以鉴定
1.抗体筛查假阳性 缗钱状反应干扰判读结果时,应用抗人球蛋白试验做对照,但抗人球蛋白试验也会出现假阳性,多见于以下几种情况:
(1)离心力不当:离心力太大时,压积红细胞不易散开,此时应进行离心机离心力的校正。
(2)试管污染:灰尘、沉淀物、纤维蛋白等能够引起细胞的聚集,从而造成假阳性。
(3)硅胶管引起的细胞聚集。
2.谱细胞单一 应采用3个以上不同生产厂家的谱细胞系,排查测定抗体特异性。
3.非特异性冷凝集抗体 室温下不产生凝集的抗体无临床意义。冷凝集抗体效价强的,在操作过程中应采用预温技术法,所有试管和试剂需要预温(参考第四篇“标准操作规程”)。
4.低效价抗体低亲和力抗体造成不规则抗体难以鉴定或易漏检。
四、抗体鉴定时无反应格局
1.同种抗体和自身抗体同时存在
此时应用自体吸收法、异体吸收法及稀释法来进一步确定。
2.冷凝集
有些冷凝集素可在30℃时存在凝集红细胞,更有些极高效价的冷凝集素引起的红细胞凝集在37℃孵育中仍不散开,可以使用冷吸收法去除冷凝集素,或者使用兔细胞基质试验(rabbit erythrocyte stroma test),配合使用预温技术(prewarm technique,参考第四篇“标准操作规程”)。
3.假凝集
某些高分子物质、血清蛋白异常、低离子强度及酸性环境等均可影响结果判读。
五、抗体鉴定应掌握的相关临床资料
(1)被检者的年龄、血型。
(2)既往输血史及妊娠史。
(3)临床诊断:尤其是自身免疫性溶血性贫血(AIHA)。
(4)近期药物治疗史(包括抗-D抗体)。
(5)患者民族和所在地区。
(卜艳红 欧阳淑娟)