第四节　液基细胞学制片技术的应用与进展

细胞学说形成以后，由于出现了供显微镜组织切片的新技术，使组织学得到长足发展，而细胞学则因技术难度大而百余年来发展缓慢。这中间的原因有历史的，有观念的，也有技术难度的，但无论如何细胞学越来越多地得到认可。但是由于受手工涂片（或称抹片）的制约，使制片质量不高且不能统一规范制片，从而影响镜检质量的保证。

一、液基细胞制片技术出现的背景

子宫颈涂片与细胞学诊断在经历了半个多世纪的坎坷经历后，终于出现了应用型的细胞制片机──液基细胞制片装置。液基薄层细胞制片技术是自细胞学被用于诊断各种疾病以来，在制片技术上革命性的进展，它使细胞学进入一个规范化制片和规范化阅片的新时代。尽管其技术还具有一些不甚完美的地方，但它已显示出在制片质量上的优势及对阅片产生的积极影响。在取材完美的情况下，制作一张合格的涂片标本，一定程度上有利于判读，甚或可以减少诊断的难度。

二、液基片的优点与缺点

在肯定液基薄层细胞技术是一个较大的进步的同时，要认识到由于它强调取材的规范化及其重要性，在很大范围内均提示取材的重要，但这一点在过去多年都未受到足够重视的程度。无论使用哪一种方法制片，在进行制片时都强调取材和改进了取材方法。不管是手工还是机器，只要最大限度保持细胞量多和显示细胞结构，阳性率才会提高。近年来发表的液基细胞制片装置提高阳性检出率的文献报道，在分析原因时，绝大多数均指出取材和阅片技能的重要性及细胞学医师的培训和规范诊断语言的必要性，至于单纯由于使用机器而提高了阳性率的概率则是很低的。在出血标本的处理上也不能令人满意，过度破坏红细胞所造成的“絮状物”背景和对上皮细胞的破坏等也会影响观察。另外，对液基标本保留肿瘤细胞之间的关系的细胞碎片和结构与质量好的直接涂片相比较，相对也差一些。

由于液基制片与传统涂片在方法及原理上各有不同，液基制片法含有先固定后涂片的程序，致使细胞收缩变小，在显微镜下的细胞学形态也有差异，故细胞学医师在阅览薄层片前需要接受短期训练。

三、巴氏涂片染色方法的普及

除了细胞学诊断规范方面的进展推广外，染色方法的统一也是需要做大量的工作。在子宫颈涂片方面，国内外推荐巴氏染色（Papanicolaou stain），但国内在长期的诊断工作中，由于参与者的不同而产生不同的染色方法并存的现象。病理医师大多习惯于HE染色，而检验师则擅长采用血液染色，巴氏染色并不很普及。建议采用统一的巴氏染色，有利于交流和统一标准，已经有厂商开发成品化生产巴氏染液，以适应医疗单位的需求。

美国等国家已立法规定巴氏染色法用于妇科或非妇科涂片中。

巴氏染色具有迄今为止任何其他染色方法无法相比的优点：细胞核细微结构清晰，能辨认染色质的分布形式；细胞质透明，质感细腻；显示细胞分化和角化程度。因此，巴氏染色是细胞学中最经典、最重要的基本染色方法。从与国际学术界交流和接轨的角度看，巴氏染色对细胞学标本的观察和共同评价等方面均具有重要意义。同时国内的细胞学界要统一细胞学的经典染色，并且适应巴氏染色涂片的诊断过程。

上述介绍的制片技术均存在一个耗材价位偏高的因素，这也是制约其广泛普及的瓶颈之一。但是无论如何，制作一张好的巴氏染色涂片对诊断的重要性怎么估计也不为高。什么都可以节约，但诊断质量是不可节约的。

在国外的实验室，有液基制片，也有不同的标本用不同的方法，大多数的针吸制片还是用直接涂片方法，这是常规工作的一部分。每天的工作量是100～200例标本。有时也接受一些诊所的巴氏涂片。美国许多社区医院（类似于中国的中小医院）至今仍然没有机器做涂片，主要是因为细胞学的工作量过小，医院不愿意花大的价钱买设备去做这项工作。一种被称为自动细胞制片的机器可以自动制片、自动染色、处理大批标本，这种机器用于中心试验室，每天接受上千张妇科涂片，可以节约劳动力。

由于对液基技术的装置缺乏基本的了解，加之某些供应商的片面宣传，使很多中小医院盲目引进机器。一些院长和临床或病理医师认为引进制片装置就等于引进了先进的高技术，引进了以后就发现远不是那么回事，才认识到除了引进机器外，还要培训病理诊断医师和临床妇科医师，还要投入大量的资金和人力，还要面临病例量的短缺和要投入人力去组织工作量。因此在这些方面，医疗行政主管部门要给予正确的引导。