结核分枝杆菌核酸检查包含多种技术，如结核分枝杆菌环介导等温扩增检测、结核分枝杆菌交叉引物等温扩增检测、结核分枝杆菌RNA实时荧光等温扩增检测、多色巢式实时荧光定量扩增检测、荧光探针实时荧光定量扩增检测等，应严格按照每种检测技术的产品说明进行。结核分枝杆菌核酸检查选取一份性状好的痰标本进行。

结核分枝杆菌核酸检查应按照产品的具体操作步骤及整合程度在适宜的实验室分区及空间内进行，人员应接受过相关培训，并严格按照产品说明进行。

应按照采取的检测方法不同设置适宜的房间和区域。必要时各个区域应配备2～8℃及-20℃冰箱储存检测试剂、核酸等。

不能使用过期试剂，按照每批次工作量对试剂进行分装或按照厂家推荐进行试剂的配制和分装，避免试剂反复冻融。

根据具体试剂操作说明决定是否需要提前取出试剂进行室温平衡，取试剂时将试剂瞬时离心确保液体不丢失，各成分配制后须充分混匀，避免取出试剂内成分浓度不均一。

核酸提取是决定扩增检测成败的关键性步骤，取标本时选取样品中性状好（脓性、干酪痰）的部分，至少取1ml痰标本。

遇到可能存在扩增抑制剂的标本（如血痰），须用缓冲液（0.9%生理盐水）清洗一次样本。

确保细菌裂解的时间和温度一定要足够，温度按照推荐温度进行（一般裂解温度为95～100℃）。

提取的核酸标本如未能立即进行扩增，应放-20℃冰箱保存。

扩增设备的温度要定期校准，确保扩增温度的准确性。扩增设备的扩增孔可定期清洁，可使用棉签蘸取10%含氯试剂擦拭，含氯试剂擦拭后应及时用蒸馏水和酒精擦拭避免腐蚀扩增设备。

每批次必须加入阳性、阴性质控样品。阴性质控即无样本对照，用于监测污染。阳性质控用于检测仪器、试剂、核酸提取及扩增过程中产生的误差。

需要进行杂交等扩增后产物分析的一定要在独立房间进行，避免发生扩增子交叉污染。

结果判读严格按照检测方法的推荐判读方法进行判读，判读结果应首先判读阴性对照和阳性对照结果，对照结果符合质控要求时本次实验结果才有效。同时结果报告应由审核人进行进一步审核。

每次开展分子检测后应进行后续的去污染操作，包括但不仅限下面几种：用10%含氯消毒剂擦拭实验台面、仪器等，在擦拭后用水再次擦拭；试验后使用紫外线照射实验操作台表面（照射距离60～90cm之内，推荐照射过夜）。

每月定期汇总分析反映结核分枝杆菌分子生物学检测工作的质量指标，连续监测各指标，指标值出现明显变化应立即查询原因，并尽快解决。

结核分枝杆菌分子生物学检测质量指标包括结核分枝杆菌核酸检测阳性比例、检测发生批次污染比例（针对分批量操作的检测）、检测发生错误、无结果、无效比例、结核分枝杆菌核酸检测实验室周转时间。

结核分枝杆菌核酸检测阳性比例=结核分枝杆菌核酸阳性标本数量/开展结核分枝杆菌核酸检查的标本数量

结核分枝杆菌核酸检测发生批次污染的比例=结核分枝杆菌核酸检测发生污染的批次/结核分枝杆菌核酸检测的批次

检测发生错误（无结果或无效）的比例=检测发生错误（无结果或无效）的标本数量/开展多色巢式实时荧光定量PCR检测的标本数量

结核分枝杆菌核酸检测实验室周转时间=实验室自收到痰标本至报告结核分枝杆菌核酸检测结果的时间间隔