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第二节 压力蒸汽灭菌器
压力蒸汽灭菌器装置严密,温度随蒸汽压力增高而升高,当压力增至103~206kPa时,温度可达121.3~132℃。压力蒸汽灭菌法就是利用压力蒸汽和高热释放的潜热(指当lg100℃的水蒸气变成lg100℃的水时,释放出2255.2J的热量)进行灭菌,为目前可靠而有效的灭菌方法。适用于耐高温、压力、不怕潮湿的物品,如防护服、手术器械、药品、细菌培养基等灭菌,感染性物品、废物的灭菌处理。对于大多数情况,下列组合可以确保正确装载的压力蒸汽灭菌器的灭菌效果:134℃,3min;126℃,10min;121℃,15min;115℃,25min。
压力蒸汽灭菌的关键在于蒸汽为热的传导提供良好条件,其中最为重要的是使冷空气从灭菌器中排出。因空气导热性差,阻碍蒸汽接触待灭菌物品并减低蒸汽分压而达不到所需灭菌温度。
一、手提式压力蒸汽灭菌器
为金属圆筒,分为两层,隔层内盛水,有盖,可以旋紧,加热后产生蒸汽。锅外有压力表,当蒸汽压力升高时,温度也随之相应升高。该灭菌器体积小,可自发蒸汽,便于携带。
操作方法如下:在灭菌器中盛水3 000ml;将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内;将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的方管中;盖好盖子,拧紧元宝螺丝,勿使漏气;锅下加热,打开排气活门,放出冷空气(一般在水沸后排气10~15min),关闭放气活门,使压力逐渐上升至103kPa,温度达121.3℃,维持20min 后,排气至“0”时,慢慢打开盖子。如果突然开盖,冷空气大量进入,蒸汽凝成水滴,使物品潮湿,且玻璃类易发生爆裂。
一般情况下,在进行具有感染性材料灭菌时不建议采用这种压力蒸汽灭菌器。
二、重力置换式(下排气式)压力蒸汽灭菌器
重力置换式压力蒸汽灭菌器的整体构造见图5-6。该灭菌器利用蒸汽比空气轻,蒸汽在压力作用下进入灭菌器,由上而下置换较重的空气并通过灭菌器的排气阀(装有HEPA过滤器)排出,从而使无菌器腔体内充满饱和蒸汽并通过增加压力提高温度进行灭菌。
图5-6 重力置换式压力蒸汽灭菌器
三、预真空式压力蒸汽灭菌器
灭菌器可以在蒸汽进入前使空气从灭菌器排出。气体是通过一个装有HEPA 过滤器的排气阀排出。在灭菌结束时,蒸汽自动排出。预真空式压力蒸汽灭菌器对于多孔性物品的灭菌很理想,但由于要抽真空而不能用于液体的压力蒸汽灭菌。
预真空式压力蒸汽灭菌器温度可达132~135℃,具有灭菌周期快、效率高,完成整个灭菌周期只需25min;冷空气排除较彻底,对物品的包装、摆放要求较宽,而且真空状态下物品不易氧化损坏的特点。但对柜体密封性要求较高,漏气量每分钟不得使负压升高值超过130Pa。存在小装量效应,即若灭菌物品放得过少,灭菌效果反而较差。小装量效应的发生主要由于物品体积愈小,在柜内残留空气愈多,对蒸汽接触物品的阻隔作用愈大所致,瓶装液体不能用此法灭菌。
操作方法如下:打开蒸汽管道阀门,首先将柜室夹层和管道内的空气和积水排净,使夹套内达到预定压力和温度(104~167℃),将待灭菌物品装入柜室,关紧柜门。柜室内抽负压至2.6kPa,向柜室内输入蒸汽,将控制阀移至“消毒”的位置。随后机器按一定程序自动运行,诸如:“恒温”“排气”“干燥”“关闭”等。待恢复常压后打开柜门取出物品。灭菌时使压力达206kPa,温度为132℃,维持4~5min。
四、生物安全型双扉压力蒸汽灭菌器
生物安全实验室专用的双扉压力蒸汽灭菌器与普通双扉脉动真空高压灭菌器不同,具备下列两个特点:
1.冷空气处理系统
生物安全实验室专用灭菌器设有冷空气处理系统,即在抽真空过程中排出舱体内污染的冷空气经HEPA 过滤器(对0.01~0.03μm 粒子过滤效率为99.999%)过滤或经过高温处理后排放,确保将排出的气体符合生物安全要求。用于生物安全四级实验室生物安全型双扉压力蒸汽灭菌器采用两级HEPA 过滤器,或采用高温(高于380℃)处理。
2.冷凝水灭菌系统
生物安全实验室所用双扉压力蒸汽灭菌器具有一套冷凝水回收与进行灭菌处理系统,在对灭菌器舱体内物品灭菌的过程中,同时对冷凝水进行灭菌,其灭菌温度、压力与时间等控制参数完全与灭菌仓相同,保证了冷凝水达到灭菌要求,安全排放。
五、压力蒸汽灭菌器检测和评价
压力蒸汽灭菌器应在安装投入使用前、更换高效过滤器时或内部部件维修时进行检测,并应进行年度的维护检测。其检测项目至少应包括灭菌效果检测、B-D 检测、压力表和安全阀检定,必要时对温度传感器和压力传感器进行校准。
灭菌效果检测应每次运行采用压力蒸汽灭菌化学指示卡检测灭菌效果,每12个月至少进行一次生物效果检测(生物指示剂:嗜热脂肪杆菌芽孢)。B-D 检测应至少每3个月进行一次(脉动真空或预真空型压力蒸汽灭菌器)。安全阀和压力表检定应按照国家相关计量检定规定。温度传感器和压力传感器校准应按照国家相关计量检定规定。
检测方法和评价要求参照RT/T199等标准要求。