现代卫生化学(第3版)
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第八章 分子荧光分析法

某些物质吸收外界能量后,其电子能级由基态跃迁到激发态,激发态不稳定,将很快释放出能量回到基态。激发态物质以光辐射的形式释放出这部分能量,根据辐射光的特征和强度建立的分析方法称为发光分析法。外界提供能量的方式有光能、热能、化学能和生物能等,物质吸收光能后的激发态又以光辐射形式回到基态,称之为光致发光。常见的光致发光有荧光(fluorescence)和磷光(phosphorescence)两种。分子荧光分析法是建立在这一现象基础上的分析方法。物质的结构不同,所吸收紫外光的波长和发射荧光的波长也不同,利用这个特性可以进行物质的定性鉴别。物质的浓度不同,所发射荧光的强度也不同,测量荧光强度可用于物质的定量分析。

分子荧光分析法是一种重要的光谱分析技术。在其他学科迅速发展的影响下,激光、微处理机和电子学的新成就等一些新的科学技术的引入,大大推动了荧光分析法在理论方面的进展,促进了诸如荧光探针技术、同步荧光测定、时间分辨荧光测定、单分子荧光检测技术、偏振荧光分析技术和荧光光纤化学传感器等新方法和新技术的发展。目前,在工业、农业、环境保护、食品分析、医药卫生、公安情报和科学研究等各个领域中都活跃着荧光测定的应用。分子荧光分析法具有取样小、灵敏度高、重现性好、快捷方便等优点。