第一章　概　述

合格的检验标本是保证检验质量的先决条件，只有合格的检验材料才有可能得到正确的检验结果。因此，评价检验结果和检验质量时必须包括合格的检验标本在内。

血液标本分为全血、血浆或血清，根据试验项目和用血量不同，可自皮肤、静脉或动脉采血。除床边试验外，全血和血浆标本需要添加抗凝剂。

　可满足用血量不超过200μl的检验，如全血细胞计数、血细胞形态学和血液寄生虫学检验，床边出血时间、血糖、血脂等快速检验以及婴幼儿某些临床化学检验，推荐使用手指采血，也可由耳垂采血，婴幼儿可在足跟部采血。但采血时应避免用力挤压以防组织液的干扰。

　是最常使用的血液标本，用于绝大多数临床化学、血清学和免疫学、全血细胞计数和血细胞形态学、出血和血栓学、血液寄生虫学和病原微生物学检验、血液和组织配型等。

用于血气分析、乳酸测定。用含有干燥肝素钠注射器或用肝素溶液充满注射器死腔和针头，过多的肝素可使pH和 pCO ₂值降低及相关计算参数错误。注射器内不得有气泡，因可改变 pO ₂结果。与静脉血比较，乳酸、 pO ₂、 sO ₂（氧饱和度）不同，如用静脉血或动脉化毛细血管血测定血气一定要注明。

对婴幼儿或儿童血气测定，可用动脉化毛细血管采血，用不超过42℃的湿巾温热采血部位皮肤，使血液增加，血流加速，达到动脉化。

塑料器材与玻璃器材，普通采血与真空采血，对某些试验有不同的影响。凝血因子测定以用塑料注射器和塑料试管为好，玻璃器材可加速血液凝固。用塑料注射器和塑料试管，因血液不易凝固，分离血清时间延长，不利于临床化学检验。普通注射器取血由于抽吸和转注，容易引起可见的或不可见的溶血，使血浆某些成分发生改变，例如K ⁺、LDH、AST升高等。

真空管采血简便、快速、省力，可连续多管采血；免去用注射器的抽吸和转注步骤，可避免或减轻机械性溶血；无血液污染，保持手、工作台面和申请单清洁，预防交叉感染，对工作人员和患者有保护作用；抗凝剂与血液比例固定，有利于保证检验质量。不能用大真空管采取小量样本血，因真空蒸发而使血液浓缩。厂商提供不同规格和不同用途的真空采血管，应按试验要求的标本性质和需血量选用，不仅可避免真空蒸发，而且还可以防止暴露蒸发。

真空管的规格和标志见表1-1。

　除全血细胞计数、血气、血氨、血沉、凝血因子、急诊生化等检验使用全血或血浆需加抗凝剂外，临床化学和免疫学检验多不用抗凝剂。草酸盐、氟化钠可抑制测试的酶活性或酶法检验的酶触反应，不推荐使用。

全血细胞计数、血细胞形态学检验推荐使用EDTA-K ₂盐，1.5mg/ml血，可保持血细胞体积不变，在1～4小时内无影响；但应及时制作血涂片，因延迟时间过长（超过4小时可使中性粒细胞颗粒消失。

凝血因子检验用枸橼酸钠抗凝优于草酸盐，因可使V因子稳定。用109mmol/L（3.2%）溶液与血液按1∶9比例，浓度与比例虽对凝血酶原时间（PT）影响不大，但对活化部分凝血活酶时间（APTT）有影响。抗凝剂pH对PT试验有影响，pH<7.1或pH>7.4可使PT延长。应在2小时内完成检验，4℃贮存不稳定，Ⅶ因子仍可激活，-20～-70℃可稳定3周。

魏氏法血沉测定用109mmol/L（3.2%）枸橼酸钠，抗凝剂与血液应严格按1︰4比例，抗凝剂多或血液少则血沉加速；反之，抗凝剂少或血液多则血沉减慢。

血气分析用肝素钠抗凝，针管中不得有残留空气，针头用橡胶泥（或橡胶瓶塞）封口，混合后放在冰盒中立即送实验室按急诊检验处理。

血氨测定用添加肝素钠的有帽试管（25U抗凝1ml血）或真空管采血，混合后立即送实验室按急诊检验处理。

血糖测定如标本放置过久，糖被血细胞分解而降低，用肝素或EDTA（均指其盐，后同）抗凝，采血后立即分离血浆，试管加塞防蒸发，室温可稳定24～48小时；用带分离胶的肝素或EDTA的真空管采血立即分离血浆，室温可保存3～4天。氟化钠虽有抑制糖酵解的作用但也能抑制测试的酶触反应。或用碘乙酸钠或碘乙酸锂0.5mg/ml血，可稳定3天。

急诊临床化学检验用肝素锂抗凝或浅绿帽真空管采血，可快速分离血浆不影响酶和电解质测定；也可用含凝血酶的真空管采血，可加速纤维蛋白原转变，缩短血液凝固时间。

血液成分受饮食、情绪和肌肉活动的影响，也受采血体位影响。采血一般应在安静、空腹状态下进行，通常取早晨静脉血，无饮食影响。为了方便门诊患者可以放宽约束，但血脂、血磷等的测定则必须空腹。血糖测定根据需要可测清晨空腹血糖、三餐前血糖、餐后2小时血糖或就寝前血糖。一些有节律性变化的成分应在规定的时间取血。

　除特殊检验外，住院患者一般应在早晨起床活动前安静卧床空腹状态下取血。这不仅是为了保证检验质量，也是为了方便临床和实验室工作；急诊检验可随时取血。

　门诊患者采血很难避免肌肉活动，应静息半小时以上，坐位取血按立位解释结果。因短时间的坐位机体无法调整体液的分布。空腹者可在上午7～9时取血，进餐者除血脂外可在上午9～12时取血。由于医院设备水平的不断提高，对门诊患者除血、尿、便常规以外非特别费时的检验项目，也应尽可能做到当时或当日等取结果以减少患者的复诊次数。

　急诊患者可以随时卧位取血，不受饮食限制，但须注意输液和用药对检验结果的影响，特别是血糖和电解质。不得在输液的同一针管或近心端血管取血，并要注明输液以及输注液体和药物种类，供实验室和临床医师解释结果时参考。

可使葡萄糖、胰岛素、三酰甘油、尿素氮、碱性磷酸酶、尿酸、胆红素、乳酸、钠升高；血清总蛋白、清蛋白、 α ₂-球蛋白、血红蛋白、血细胞比容、游离脂肪酸、钾（高糖食物时）、无机磷降低。

虽可影响某些成分，但进餐90分钟后多数试验项目与对照组比较无统计学意义。为方便门诊患者，除下述应在空腹取血的项目外，一般在午餐前3小时内取血不妨碍临床评价，但应注明进餐和取血的时间以便解释结果时参考。

血脂、血清铁、铁结合力、维生素B ₁₂、叶酸、胃泌素、抗体；血糖和胆汁酸有时需要在餐前或餐后测定。

指禁食6小时以上。血脂测定应禁食12～14小时，不禁水，但须忌茶、咖啡、烟、酒或药物。

　对有周期变化的成分测定，应按规定的时间取血，如促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇，应在上午8点和下午4点两次取血，了解其分泌水平和分泌节律；醛固酮（ALD），应在早6～8点或 8～10点分别采取立位和卧位静脉血；甲状旁腺激素（PTH），最好在早8点取血；急性心肌梗死（AMI）发病后，心肌酶变化有一定的规律，应记录取血的时间。

　静脉压迫时间过长，引起淤血，静脉扩张，水分转移，血液浓缩，氧消耗增加，无氧酵解加强，乳酸升高，pH降低，K ⁺、Ca ²⁺、肌酸激酶升高。

静脉取血技术要熟练，止血带压迫时间以不超过40秒为宜，乳酸测定最好不用止血带或针头刺入静脉后立即解除止血带。

　应尽量避免输液时取血，输液不仅使血液稀释，而且对测试发生严重干扰，特别是糖和电解质；不得已时可在对侧手臂或足背静脉取血，并要注明输液及其种类。在一般情况下，推荐中断输液至少3分钟后取血，但也要加以注明。

　红细胞某些成分与血浆不同，标本溶血可使红细胞成分释放干扰测定结果，应尽力避免人为因素造成的机械性溶血。

取血器材必须无菌、干燥、洁净，避免特别用力抽吸和推注，避免化学污染和细菌污染；推荐使用真空管采血。

出于不同的目的，可测定空腹、餐后、睡前以及夜晚任何时间的血糖，不同时间采血其临床意义不同。可用静脉血或末梢血。用于糖尿病监测以用末梢血快速测定较为简便，用于糖尿病诊断则必须用静脉血标准法测定，因快速法误差太大，不能满足临床需要。

　用于住院常规检查、健康体检、人群普查和糖尿病流行学研究（如仅测血糖，则以餐后血糖为敏感），以及胰岛储备功能和基础分泌水平评价。一般在早6～8时空腹取血，住院患者也不可以取血过早，以免因放置时间过长而使血糖降低，如为临床需要则应按急诊及时送检，立即测定。

用于糖尿病治疗监测和疗效评价。在午餐前和晚餐前30分钟内取血；或为方便门诊患者测午餐前血糖，意义同空腹血糖。空腹或餐前血糖正常不能排除糖尿病。

　用于糖尿病早期筛查和流行病学研究、诊断和治疗监测、药物调整和疗效评价。

（1）用于糖尿病筛查、流行学研究和糖尿病早期诊断，较空腹血糖敏感。一般应在摄取谷类食物干重不少于100g的早餐后2小时取静脉血，用标准法（葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法）测定；由于升糖激素水平的因素，早餐后血糖较午餐后更为敏感。

（2）用于糖尿病治疗监测、药物调整和疗效评价，可用简便快速的血糖仪测定。

1）自我监测：应分别测定口服降糖药和胰岛素注射的早、午、晚三餐后2小时血糖，每周1天或2天。根据餐后血糖水平逐步调整降糖药或胰岛素剂量，直至达到最佳控制状态。

2）门诊监测：测定口服降糖药或胰岛素注射的早餐后和午餐后2小时血糖；或为方便患者也可测定餐后1～3小时血糖。餐后不同时间的血糖，判定标准不同（1小时PPG<8.9mmol/L，2小时PPG<7.8mmol/L，3小时PPG<6.7mmol/L）。

　为防止夜间低血糖发生或鉴别清晨高血糖原因，监测就寝前（例如晚9～10时）血糖，或必要时加测夜间0时、2时、4时或早晨6时血糖。此时以用末梢血床边快速测定为好。

尿化学定性和常规检验应留取中段尿，女性须用湿消毒纸巾擦净外阴部以免阴道分泌物混入。按留取标本的时间，尿标本分为以下几种：

清晨第一次尿，较浓缩，适用于化学成分和有形成分检验。但常因留取后至送检放置时间过长，尿液温度降低盐类成分析出、细菌繁殖和尿素分解，使尿液变碱性，影响相对密度（比重）、亚硝酸盐和酸碱度测定的准确性。

清晨起床后首先将第一次尿排出并弃去，仍在空腹、静息状态下收集第二次排出的尿标本。

适用于化学成分和有形成分检验。尿液比较稀薄，对亚硝酸盐和细菌学检验不如清晨首次尿敏感；但方便患者，适合门诊或健康体检，尿液新鲜，有形成分和酸碱度可保持不变。亚硝酸盐试验须留取在膀胱存留3小时以上的尿，立即检验。

为某种特殊需要检查一定负荷后的尿，如葡萄糖负荷后的糖耐量试验、菊糖负荷后的菊糖清除率试验、运动负荷后的运动后血尿、起立活动后的直立性（体位性）蛋白尿等。

进餐前排尿弃去，留取餐后2小时尿检测尿糖或常规，用于糖尿病筛查和糖尿病流行学研究，糖尿病治疗监测、药物调整和疗效评价。

早、午、晚三餐前0.5～1小时排尿弃去，进餐前再留取尿标本检测尿糖。此为进餐前两次尿液间隔的一小段时间内肾脏排泌的尿，尿糖浓度反映餐前空腹（或餐后3～4小时）的血糖平均水平。用于糖尿病治疗监测和疗效评价。

夜晚就寝前（如9时）排尿弃去，就寝时（如10时）留取尿标本检测尿糖，用于监测夜间血糖水平，预防药物性低血糖反应和评价晨间高血糖原因。

须先排尿弃去，计时，准确留取规定时间内的全部尿液。留取3小时尿，用于测定细胞排泄率；留取4小时尿，用于测定肌酐清除率；留取12小时尿，用于Addis计数；留取24小时尿，用于化学成分定量。一般自早7时或8时起排净膀胱，尿液弃去并计时，准确收集规定时间内的全部尿液。留取期间尿液须置4～8℃冷藏；或容器中先加入100g/L麝香草酚异丙醇溶液5～10ml防腐；或用二甲苯1～2ml防腐，适用于化学成分检验；或用甲醛防腐，适用于有机成分检验。

要保持清洁，避免化学品和细菌污染，最好使用一次性尿杯。

　要求新鲜，留取后1小时内检验，否则应冷藏，测试前须复温。

　亦即定量尿标本，必须留取规定时间内的全部尿液，时间开始的尿排净弃去，时间结束的尿排净收集，不得遗失，记录尿量，混匀后取 10～20ml送检。

　容器须用10%硝酸浸泡24～48小时，用蒸馏水洗净，在无落尘的空气中干燥备用。

通常采用自然排出的粪便，采集方法是否得当直接影响检验结果的准确性。采集时应注意以下几点：

　要求新鲜，不得混有尿液及其他成分；盛器需干燥洁净，最好使用一次性有盖的塑料专用容器。标本采集后应及时送检，最好在1小时内检查完毕。否则由于消化酶和酸碱度变化等的影响，导致有形成分的破坏。

应用干净竹签选取有脓血、黏液等成分的粪便，外观正常时应注意从粪便的不同部位多处取材，其量至少为指头大小（5g）。

　检查溶组织内阿米巴原虫滋养体时应于排便后立即检查，寒冷季节标本传送及检查时均须保温；检查日本血吸虫卵时应取脓血、黏液部分，孵化毛蚴时至少留取30g粪便，且须尽快处理；检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子或棉拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。

　应将标本采集于无菌有盖容器内。

　用化学法做隐血试验时，应于3天前禁食动物血、肉类、肝脏，并禁服铁剂及维生素C等药物。

可用拭子采取，不宜采用肛诊法和使用泻剂或灌肠后的粪便标本。

　粪便检验后，应将剩余标本与盛器一同焚烧消毒。

参考微生物检验的痰标本留取。

一般情况下应在患者发热初期或发热高峰时采集。原则上应选择在抗生素应用之前，对已用药而因病情不允许停药的患者，也应在下次用药前采集。

最易获得阳性培养的是发热期的血液或骨髓。除发热期采血外还可多次采血，一般为24小时抽3～4次。

根据病程和病情可在不同的时间采集标本。肠热症患者在病程第1～2周内采集静脉血液，或在第1～3周内采集骨髓是最佳时间。

除在发热期采血外应多次采集。第—天做3次培养，如果24小时培养阴性，应继续抽血3份或更多次进行血液培养。

治疗前1～2小时内分别在3个不同部位采集血液，分别进行培养。

脑膜炎、骨髓炎、关节炎、急性未处理的细菌性肺炎和肾盂肾炎除在发热期采血外，应在治疗前短时间内于身体不同部位采血，如左、右手臂或颈部，在24小时内采血3次或更多次，分别进行培养。

最佳时机是在寒战、高热或休克时，此时采集样本阳性率较高。

可于发热周期内多次采血做血液培养。如果24小时培养结果阴性，应继续采血2～3份或更多次做血液培养。

　采血量以每瓶5～8ml为宜。当怀疑真菌感染时采集双份容量。

（1）培养瓶必须平衡至室温，采血前后用75%乙醇或碘伏消毒培养瓶橡胶瓶盖部分。采集标本后应立即送检，如不能及时送检，请放在室温。在寒冷季节注意保温（不超过35℃）。

（2）标本瓶做好标记，写好患者姓名、性别、年龄、病历号。

（3）严格做好患者采血部位的无菌操作，防止污染。

（4）应在申请单上标明标本采集时间。

（5）如同时做需氧菌及厌氧菌培养，应先把血样打入厌氧瓶，再打入需氧瓶，且要防止注射器内有气泡。

（1）一般原则：通常应采集晨起第一次尿液送检。原则上应选择在抗生素应用之前采集尿液。

（2）沙门菌感染一般在病后2周左右采集尿液培养。

（3）怀疑泌尿系统结核时，留取晨尿或24小时尿的沉渣部分10～15ml送检。

①女性：以肥皂水清洗外阴部，再以灭菌水或高锰酸钾（1∶1000）水溶液冲洗尿道口，然后排尿弃去前段，留取中段尿10ml左右于无菌容器中，立即加盖送检。②男性：以肥皂水清洗尿道口，再用清水冲洗，采集中段尿10ml左右于无菌容器中立即送检。

采集中段尿有时不能完全避免污染，可采用耻骨上膀胱穿刺取尿10ml并置于无菌容器中立即送检。

将导尿管末端消毒后弃去最初的尿液，留取10～15ml尿液于无菌容器内送检。长期滞留导尿管患者，应在更换新管时留尿。

　尿液标本采集和培养中最大的问题是细菌污染，因此要严格无菌操作，标本采集后应立即送检。无论何种方法采集尿液，均应在用药之前进行，尿液中不得加入防腐剂、消毒剂。

腹泻患者应在急性期采集，以提高检出率，同时最好在用药之前。

肠热症在2周后；胃肠炎患者在急性期，早期采集新鲜粪便。

自然排便后，挑取有脓血、黏液部位的粪便2～3g，液状粪便取絮状物盛于无渗、漏、清洁的容器中送检。

如不易获得粪便或排便困难的患者及幼儿，可用拭子采集直肠粪便，取出后插入灭菌试管内送检。

（1）为提高肠道致病菌检出率，应采集新鲜粪便做培养。

（2）腹泻患者应尽量在急性期采集标本（3天内），以提高阳性率。

（3）采集标本最好在用药之前。

最好在应用抗生素之前采集标本，以早饭前晨痰为好，对支气管扩张症或与支气管相通的空洞患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰液。

时间上虽无严格限制，但应于抗生素治疗之前采集标本，咽部是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后早饭前为宜。

①自然咳痰法：患者清晨起床后，用清水反复漱口后用力自气管咳出第一口痰于灭菌容器内，立即送检。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入加温至45℃的10%NaCl水溶液，使痰液易于排出。对咳痰量少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽，将痰收集于灭菌容器内送检。②支气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或支气管刷直接取得标本，该方法在临床应用有一定困难。③小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用无菌棉拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物沾在棉拭子上，立即送检。

采集上呼吸道标本通常采用无菌棉拭子。采集前患者应用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，但棉拭子要避免接触口腔和舌黏膜。

　外伤感染、癌肿溃破感染、脐带残端、外耳道分泌物等感染部位与体腔或外界相通，标本采集前先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌，用无菌棉拭子采集脓液及病灶深部分泌物；如为慢性感染，污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，无菌操作剪碎或研磨成组织匀浆送检。

脓性分泌物较多时，用无菌棉球擦拭，再用无菌棉拭子取结膜囊分泌物培养或涂片检查；分泌物少时，可做结膜刮片检查。

患者用清水漱口，由检查者将舌向外牵拉，将无菌棉拭子越过舌根涂抹扁桃体上的脓性分泌物，置无菌管内立即送检。

脓性分泌物较多时，先用无菌棉球擦拭，再取流出分泌物置无菌管送检。

疑有切口感染时可取分泌物，也可取沾有脓性分泌物的敷料置灭菌容器内送检。

应做导管尖端涂抹培养再加血培养。

用无菌棉拭子挤压瘘管，取流出脓液送检；也可用灭菌纱布条塞入瘘管内，次日取出送检。

（1）皮肤化脓（毛囊炎、疖、痈）和皮下软组织化脓感染：用2.5%～3.0%碘酊和75%乙醇消毒周围皮肤，穿刺抽取脓汁及分泌物送检，也可在切开排脓时，以无菌注射器或无菌棉拭子采集。

（2）淋巴结脓肿：经淋巴结穿刺术取脓液，盛于无菌容器内送检。

（3）乳腺脓肿、肝脓肿、脑脓肿、肾周脓肿、胸腔脓肿、腹腔积液、心包积液、关节腔积液：可在手术引流时采集脓液或积液，也可做脓肿或积液穿刺采集脓液或积液，盛于无菌容器内立即送检。

（4）肺脓肿：体位引流使病肺处于高处，引流的支气管开口向下，痰液顺体位引流至气管咳出；也可在纤维支气管镜检查或手术时采集。

（5）胆囊炎：①十二指肠引流术采集胆汁，标本分三部分，即来自胆总管、胆囊及肝胆管。②手术时采集：在进行胆囊及胆管手术时，可从胆总管、胆囊直接采集。③胆囊穿刺法：进行胆道造影时采集胆汁。

（6）盆腔脓肿：已婚妇女可经阴道后穹隆切开引流或穿刺采集脓液，也可在肠镜暴露下经直肠穿刺或切开引流采集脓液检查。

（7）肛周脓肿：在患者皮肤黏膜表面先用碘酊消毒，75%乙醇脱碘，再用无菌干燥注射器穿刺抽取脓液，盛于无菌容器内立即送检。

①尿道分泌物：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭尿道口，采取从尿道口溢出的脓性分泌物或用无菌棉拭子插入尿道口内2～4cm轻轻旋转取出分泌物。②前列腺液：清洗尿道口，用按摩法采集前列腺液盛于无菌容器内立即送检。③精液：受检者应在5天以上未排精，清洗尿道口，体外排精液于无菌试管内立即送检。

①尿道分泌物：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭尿道口，然后从阴道的后面向前按摩，使分泌物溢出，无肉眼可见的脓液，可用无菌棉拭子轻轻深入前尿道内，旋转棉拭子，采集标本。②阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用无菌棉拭子采集阴道口内4cm内侧壁或后穹隆处分泌物。③子宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用灭菌棉球擦拭子宫颈口分泌物，用无菌棉拭子插入子宫颈管2cm采集分泌物，转动并停留10～20秒，让无菌棉拭子充分吸附分泌物，或用去掉针头的注射器吸取分泌物，将所采集分泌物盛于无菌容器内立即送检。

（1）生殖器是开放性器官，标本采集过程中，应严格遵循无菌操作以减少杂菌污染。

（2）阴道内有大量正常菌群存在，采取子宫颈标本应避免触及阴道壁。

（3）沙眼衣原体在宿主细胞内繁殖，取材时拭子应在病变部位停留十几秒钟，并应采集尽可能多的上皮细胞。

怀疑为脑膜炎的患者，应立即采集脑脊液，最好在使用抗生素以前采集标本。

用腰穿方法采集脑脊液3～5ml，一般放入3个无菌试管，每个试管内1～2ml。如果用于检测细菌或病毒，脑脊液量应大于或等于1ml；如果用于检测真菌或抗酸杆菌，脑脊液量应大于或等于2ml。

①如果用于检测细菌，收集脑脊液后，在常温下15分钟内送到实验室。脑脊液标本不可置冰箱保存，否则会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟菌，肺炎链球菌和嗜血杆菌。常温下可保存24小时。②如果用于检测病毒，脑脊液标本应放置冰块，在4℃环境中可保存72小时。③如果只采集了1管脑脊液，应首先送到微生物室。④做微生物培养时，建议同时作血培养。⑤采集脑脊液的试管不需要加防腐剂。⑥进行腰穿过程中，严格无菌操作，避免污染。

怀疑感染存在时，应尽早采集标本，一般在患者使用抗生素之前或停止用药后1～2日采集。

①首先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。②用针穿刺法抽取标本或外科手术方法采集标本，然后放入无菌试管或小瓶内，立即送到实验室。③尽可能采集更多的液体，至少1ml。

①在常温下15分钟内送到实验室。除心包液和做真菌培养外，剩余的液体可在常温下保存24小时。如果做真菌培养，上述液体只能在4℃以下保存。②应严格无菌穿刺。③为了防止穿刺液凝固，最好在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液。④对疑有淋病性关节炎患者的关节液，采集后应立即送检。

（1）用适当方法准确采集感染部位的标本，避免污染。

（2）注意标本采集时间。清晨的痰和尿含菌较多，是采集这类标本的最佳时间。另外应尽可能在使用抗真菌药物前采集。

（3）标本采集量应足够。如从血中分离真菌，一般采集量为 8～10ml。

（4）所用于真菌学检验的标本均需用无菌容器送检。

（5）对送检项目有特殊注意事项时，一定要在检验申请单上注明，或直接与真菌实验室联系，以便实验室采用相应特殊方法处理标本。

①皮肤标本：皮肤癣菌病采集皮损边缘的鳞屑。采集前用75%乙醇消毒皮肤，待挥发后用手术刀或玻片边缘刮取感染皮肤边缘，刮取物放入无菌培养皿中送检。皮肤溃疡采集病损边缘的脓液或组织等。②指（趾）甲：甲癣采集病甲下的碎屑或指（趾）甲。采集前用75%乙醇消毒指（趾）甲，去掉指（趾）甲表面部分，尽可能取可疑的病变部分，用修脚刀修成小薄片，5～6块为宜，放入无菌容器送检。③毛发：采集根部折断处，不要整根头发，最少 5～6根。

①血液：采血量视所用真菌培养方法确定，一般为8～10ml。如用溶剂-离心法，成年人则需抽血15ml加入2支7.5ml的Isolator管中。此法可使红细胞和白细胞内的真菌释放出来，尤其适用于细胞内寄生菌，如荚膜组织胞浆菌和新型隐球菌的培养。采血后应立刻送检，如不能及时送检，血培养瓶或管应放在室温或30℃以下环境，但不要超过8～9小时，否则影响血中真菌的检测。②脑脊液：不少于3～5ml，分别加入两支无菌试管中送检。一管做真菌培养或墨汁染色，另一管用于隐球菌抗原检测或其他病原菌培养。其他深部真菌感染的标本采集，如呼吸道、泌尿生殖道等标本，采集及送检方法与细菌学检验相同。

适用于脑脊液常规及糖、蛋白、氯化物定量等检验。

（1）脑脊液标本由临床医师采集，医护人员必须明确通知患者脑脊液标本的采集注意事项。

（2）在脑脊液标本采集前，应使患者尽量减少运动以保持平静，患者安静15分钟后卧床进行采集。

（3）脑脊液标本由临床医师采集，准备好采集标本所用的容器以及消毒器材、一次性注射器等。确认患者姓名，并将姓名或标本标识贴于标本采集试管上。

（4）临床医师必须对患者讲清楚脑脊液标本检验的目的（脑脊液检验主要对神经系统疾病的诊断、治疗及预后判断提供依据），采集前应向患者作适当解释，以消除疑虑和恐惧，并检查患者有无颅内压增高症状和体征，做眼底检查。告知患者脑脊液标本采集的适应证和禁忌证。

（5）将脑脊液分别收集于3个无菌小瓶（或试管）中，每瓶（管）1～2ml，第一瓶（管）做细菌学检查，第二瓶（管）做化学或免疫学检查，第三瓶（管）做常规检查。

（6）脑脊液标本采集后，让患者去枕平躺2～4小时，严密观察病情，注意生命体征和瞳孔的变化。

（7）脑脊液标本留取后应立即送检。如送检时间过长，超过2小时不能做脑脊液检查。不能及时送检的标本，应2～8℃（生化检验）或室温（常规检验）保存，但不要超过2小时。脑脊液放置过久，细胞可破坏或沉淀后纤维蛋白凝集成块，导致细胞分布不匀而使计数不准确；葡萄糖酵解造成糖含量降低。

胸腹腔积液的标本采集由临床医生负责进行，穿刺必须严格无菌操作，标本采集后分别加入3支试管，第一管用于微生物和化学检查；第二管用于细胞学检查，第一、第二管可加入25U/ml肝素抗凝，第三管不加抗凝剂，置于透明试管以观察一般性状和有无凝集。

　将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内（不能用乳胶避孕套），特别是前几滴。