第五节　性病检查

主要包括淋球菌检查、衣原体检查、支原体检查和梅毒螺旋体检查等。

（一）淋球菌检查

1.方法

（1）标本采集：

用含无菌生理盐水的棉拭子伸入男性尿道2～4cm，轻轻转动取出分泌物；女性先用无菌的脱脂棉擦去阴道内黏液，再用无菌的棉拭子插入宫颈内1～2cm处旋转取出分泌物；淋病相关的结膜炎取结膜分泌物；播散性淋球菌感染患者取关节穿刺液；淋病相关的前列腺炎患者取前列腺液。

（2）直接涂片：

主要用于急性感染患者。自然干燥、加热固定后做革兰氏染色，油镜下检查。

（3）细菌培养：

标本立即接种于血琼脂或巧克力琼脂平板上，置于含5%～10%的CO2孵箱，37℃孵育24～48小时后观察结果。挑选可疑菌落做涂片染色镜检，也可用氧化酶试验或糖发酵试验进一步鉴定。

2.结果

涂片染色镜检可见大量分叶核细胞，细胞内、外可找到成双排列、呈肾形的革兰氏阴性球菌（图5-7）。培养基上可见圆形、稍凸、湿润、光滑、透明到灰白色的菌落，直径为0.5～1mm，生化反应符合淋球菌特性。

3.临床意义

直接涂片镜检阳性者可初步诊断，但阴性不能排除诊断；培养阳性可确诊。

（二）衣原体检查

衣原体检查的方法主要包括细胞培养法、衣原体抗原检测法和免疫荧光法。

1.细胞培养法

将每份标本接种于3个培养瓶（培养瓶中为McCoy单层细胞，McCoy细胞是衣原体敏感的细胞株之一）中，置37℃ 2小时后，用维持液洗涤2～3次，加生长液，37℃培养3～4天，经碘染色、或吉姆萨染色、或直接荧光染色后镜检。阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色，吉姆萨染色呈红色。有尿道炎症状，再加上衣原体分离培养阳性者可确诊。

2.衣原体抗原检测法（clearview chlamydia，简称C-C快速法）

该方法采用商品试剂盒，优点是方便、简单和快速，不足是稳定性略差。结果判定：质控窗和结果窗均呈现一条蓝带者为阳性，阴性者结果窗无变化，仅质控窗呈现一条蓝带。阳性结果结合临床可确定沙眼衣原体感染，阴性时不能完全排除，可用细胞培养法进一步确定。

3.免疫荧光法

采集标本方法同淋球菌检查。将标本涂于玻片凹孔或圆圈中，干燥处理后加荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体，反应、封固后置显微镜下检查。阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞内的原体颗粒，为单一、针尖大小、明亮的绿色荧光，油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构，也可见网状体。

（三）支原体检查

标本采集方法同淋球菌检查，也可用10ml中段尿离心（2000r/min，10min），取沉渣接种于液体培养基。置5%～10% CO2环境中，37℃培养24～72小时，每日观察颜色变化。如由黄色变为粉红色，可能有解脲支原体生长。取0.2ml培养物接种到固体培养基上，培养48小时后观察，有典型“油煎蛋”状菌落者为阳性，结合临床症状、体征可诊断支原体感染。

（四）梅毒螺旋体检查

1.梅毒螺旋体直接检查

标本取自皮损组织渗出物、淋巴结穿刺液或组织研磨液。检测方法有三：①暗视野显微镜：可看到细长、两端尖直的螺旋体，折光性强（图5-8），且沿纵轴旋转伴轻度前后运动；②特殊染色：如镀银染色（螺旋体呈棕黑色）、吉姆萨染色（呈桃红色）或墨汁负染色；③直接免疫荧光检查：螺旋体呈绿色荧光。

2.快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma reagin test，RPR）

（1）原理：

因为抗原为牛的心磷脂，故该方法为非梅毒螺旋体抗原血清试验。因为该方法的敏感性高，但特异性差，故用作梅毒的诊断筛选试验。

（2）操作方法：

①卡片定性试验：取50μl待检血清加入卡片的圆圈内并涂匀，用专用滴管加入摇匀的抗原1滴，将卡片旋转8分钟后立即观察结果，出现黑色凝聚颗粒和絮片为阳性；②卡片定量试验：用等量盐水在小试管内作 6 个稀释度，即 1∶1、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32，每个稀释度取 50μl血清加入玻片圆圈中，按定性法测定。

类似方法还有性病研究实验室试验（venereal disease research laboratory test，VDRL）、不加热血清反应素试验（unheated serum reagin test，USR）等。

（3）临床意义：

结果为阳性时，临床表现典型，可初步诊断，确诊需做梅毒螺旋体抗原血清试验。因为梅毒经正规治疗后定量试验的滴度可下降或转阴，复发或再感染后该试验可由阴转阳、滴度升高，故定量试验可作为梅毒的疗效判定、复发及再感染判断的手段。假阴性常见于一期梅毒硬下疳出现后的2～3周内（抗体尚未产生）、感染梅毒立即治疗、晚期梅毒或二期梅毒的“前带现象”。假阳性常见于自身免疫性疾病、麻风、海洛因成瘾者、少数孕妇及老人。

梅毒血清试验的前带现象（prozone phenomenon）是免疫学检测过程中的现象之一，是指不到1%的二期梅毒患者中，用其血清做RPR时结果呈阴性或弱阳性反应，而在血清稀释后反而为阳性。其原因是患者血清中的抗体相对于抗原而言过剩，结果导致所形成的免疫复合物反而减少，而不出现阳性结果。

3.梅毒螺旋体颗粒凝集试验（treponema pallidum particle agglutination test，TPPA）

（1）原理：

本试验抗原是梅毒螺旋体的特异性抗原，所以特异性和敏感性均强，相对于非梅毒螺旋体抗原血清试验而言，被称为梅毒螺旋体抗原血清试验。具体操作方法为：将感染家兔睾丸中提取的梅毒螺旋体纯化，并以超声粉碎后作为抗原，以明胶颗粒为载体。

类似方法有梅毒螺旋体血凝试验（treponema pallidum particle hemagglutination assay，TPHA）、荧光螺旋体抗体吸收试验（fluorescent treponema antibody-absorption test，FTA-ABS）。

（2）临床意义：

阳性结果可明确诊断。感染梅毒后TPPA长期甚至终身阳性，故该试验不能用于梅毒的疗效判定、复发及再感染的判断。