孟加拉国Uddin等 ^［1］从中央监狱采集915名结核疑似患者的痰标本，同时用集菌法和直接涂片法镜检进行检测，发现以改良罗氏培养的结果作为判断标准，两种方法的阳性检出率分别为70.5%（74/105）和82.9% （87/105），后者可显著提高结核检出率。印度的Vignesh等 ^［2］探讨了集菌法单份痰标本检测能否提高涂片镜检的检出率。通过实验证明集菌法可显著提高HIV感染者以及HIV感染状况不明者中结核分枝杆菌（ Mycobacterium tuberculosis，Mtb）涂片检出率。尼日利亚Dinic等 ^［3］探讨了集菌法痰涂片可能会导致结核合并感染HIV患者的诊断的假阳性，借助分子诊断技术可降低误诊。所有涂片标本都做了基因型MTBDRplus鉴定结核分枝杆菌，其他细菌用16sRNA进行鉴定。HIV感染者的415份抗酸染色阳性痰标本中只有56%（233/415）确定为结核分枝杆菌。浓缩法痰涂片只有检测出（++）以上的结果才可预测为TB。经过抗逆转录病毒鸡尾酒疗法治疗的患者比未经治疗的患者感染TB的可能性低。在65例不能确诊为TB的标本中，32例（49%）被认定含有非结核分枝杆菌（NTM）、红球菌属、诺卡菌属、棒状杆菌属。

Davis等 ^［4］检索了MEDLINE、EMBASE、BIOSIS和SCIENCE 在2005年1月1日至2012年2月14日之间发表的有关就诊当天标本涂片镜检与标准的连续2天留取标本痰涂片镜检为培养确诊肺结核的诊断准确性研究文章，最终对5篇文章中涉及的8个相关研究共7771例疑似肺结核标本两种涂片镜检法进行了系统回顾和荟萃分析。与连续采集2天以上痰标本的标准涂片镜检方法相比，检查同一天采取了2个涂片的灵敏度分别为64%、63%，特异性均为98%。印度学者Nayak等 ^［4］的研究却建议谨慎对待WHO推荐的用于替代现有留标本规程的就诊当天标本涂片镜检法。该研究依据印度国内当前的国家结核病指导原则收集了2012年10月到2013年3月的2251例成人疑似结核患者的晨痰和就诊时留标本各一份，并请患者在现场留标本1小时后多留取一份痰标本进行涂片镜检。结果发现当天显微镜法对涂阳检出率为14%，相比之下，常规方法为17% （ P＜0.001）。前者漏检阳性病例数为73例（16.9%），后者只有2例（0.5%）。

乌干达Tapley等 ^［5］评估了新型移动数字化荧光显微镜检测痰涂片对结核病诊断的价值。该研究使用的装置名为CellScope的在塑料箱中装有LED和商品化手机照相机，与笔记本连接，可将图像传输放大最大至3500倍到显示屏上观察，并能长期保存拍摄图片。在含有72%HIV阳性，39%经培养确诊为TB的患者痰标本中，CellScope和常规LED-FM的阳性检出率分别为34%、32%；特异性分别为85%、92%。此外，研究者将43张涂片由不同观察者用该设备进行重复判读，结果证实不同观察者用CellScope对结果判读Kappa值的影响无统计学意义。Marzouk等 ^［6］以培养结果为标准，盲检比较了常规的荧光显微镜（CFM）和发光二极管性能（LED）的荧光显微镜（FM）在结核高发地区的临床样品中抗酸杆菌（AFB）涂片结果。CFM和LED-FM阳性检出率分别为79.4%、82.2%，特异性均为97.2%。印度尼西亚Chaidir等 ^［7］采用LED荧光显微镜检测404例门诊疑似结核患者痰标本，其中256例为HIV阳性。LED-FM与FM的阳性检出率分别为75.5%、54.9%，特异性分别为90%、96.6%。LED-FM可明显缩短检测时间，仅为（2.23±0.78）分钟/张。中国Xia等 ^［8］评价了LED-FM在基层实验室应用的可行性。共收集11 288份痰标本进行涂片镜检，每份标本涂2张片，分别使用齐-内（简称Z-N）法和LED-FM法进行染色、镜检，比较两种方法在阳性检出率及读片时间等方面的差异。LED-FM法的阳性涂片检出率为11.20%（1263/11 276），较Z-N法（8.59%，969/11 276）提高2.61%。读片时间LED-FM法为（120.03±38.9）秒，明显短于Z-N法的（206.3±75.9）秒（ t=28.12， P＜0.05）。Z-N法和LED-FM法检测成本分别为US$2.20±0.58、US$1.97±0.71（ t=5.08， P＜0.05）。基层实验室使用LED-FM法较Z-N法能够提高涂片镜检的阳性检出率，且读片时间明显缩短，在我国基层实验室应用具有较好前景。

利比亚Gammo等 ^［9］探讨并验证了患者仅在就诊当天留2份痰标本替代连续2天留3次痰标本的可行性。通过412例疑似TB患者的2种留痰标本检测结果比较，发现2种方法标本用于涂片镜检以及培养的阳性检出率在65%～67%，特异性均在96%～97%，无统计学意义。赵立平等 ^［10］分析了采用简单法和离心集菌法处理痰标本，以及采用集菌法处理痰标本时不同离心条件对罗氏培养检测结果的影响。罗氏培养过程中，简单法的阳性率与集菌法接近，但由于简单法操作简单、污染率较低，初生长时间较短，因而可能更符合临床的需要；应用集菌法进行罗氏培养时，离心力或离心时间的变化可能会影响培养的阳性率。法国Ghodbane等 ^［11］对痰标本进行磁珠吸附处理，对结核分枝杆菌培养进行了评价。结果证实该技术的痰标本80% （40/50）培养阳性。与传统的离心处理步骤比较，两者报告时间几乎一致，但前者可缩短10～20分钟的处理时间。

与成人不同，儿童肺结核获取细菌学检查标本的质及量难以达到，常常需要诱导痰或抽取胃液、鼻咽部吸出物等用于涂片、培养等方法检测结核分枝杆菌。Ruiz Jiménez等 ^［12］对22例（1～14岁）可疑结核病儿童的诱导痰（IS）与胃液（GL）进行了比较；17例临床诊断为结核病；10例（58.8%）IS或GL结核分枝杆菌（+）；8 例（47.1%）GL、7例（41.2%）IS结核分枝杆菌培养（+）。诱导痰简便、安全、可耐受，对儿童肺结核标本采集可作为一种补充技术。Parashar等 ^［13］对可疑胸内结核病儿童胃液中和后是否会影响结核分枝杆菌培养结果进行了分析，116例6个月至14岁儿童，每天抽取胃液2次，分为2等份，1份用碳酸氢钠中和，1份未中和，2份均进行涂片及培养；结果232份胃液中12份（5.17%）涂片（+），中和与否没有明显差别；中和后胃液BACTEC960培养阳性率明显低于未中和者（16% vs 21.5%， P=0.023）；中和后污染率明显高于未中和者（17.2% vs 3.9%， P=0.001）；两者方法培养一致性为66.5%（ P=0.001）。因此，作者推荐在培养前不必中和胃液。Grewal等 ^［14］对HIV高流行背景下35例血行播散性结核病儿童实施骨髓活检，除骨髓形态检查外，同时进行Z-N抗酸染色、结核分枝杆菌培养；25例通过临床和实验室指标诊断为结核病；10例为其他疾病；外周血培养阳性率不到1%，骨髓培养阳性率不超过5%；11/35骨髓活检中呈肉芽肿表现抗酸染色阳性。骨髓活检对那些临床上高度怀疑血行播散性结核病，但又缺乏其他非侵入性检查者有一定帮助。