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六、 重组促性腺激素的介绍
促性腺激素制剂引入到IVF和ICSI明显增加了对绝经期尿液的需求。在今年的开始,需要1.2亿公升的尿液来满足全世界的需求。越来越明显的是,对于不断增长的世界需求,尿液供应是永远不够的。重组DNA技术现在允许生产无限量的有药理学活性的纯FSH、LH和hCG制剂,通过生物污染传播的疾病风险也最小化了。
1997年,Agrawal等人报道了第一例低垂体低促性腺激素女性(WHOⅠ类)通过重组FSH、LH和hCG促卵泡增长诱导排卵后妊娠。2002年,Donderwinkel等报道了一例多囊卵巢患者通过rFSH诱导排卵后妊娠。最近生产rFSH(α-促卵泡素)的进步使大批量rFSH在亚型和多糖分布上有高度一致性。这个制剂与尿中获得的FSH相比,其重要优势在于它可以通过蛋白含量(每毫克中的量),而不是生物活性对FSH进行量化;这种纯度提供了最好的风险减小化措施,保证优良质量和产品批次一致性。体内生物测定的系数通常是20%,通过理化分析技术如分子筛高性能液相色谱法(size exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC)测定时为2%。因此,Serono国际现在通过SE-HPLC量化rFSH (Gonal-Fw)蛋白,这是一个精确和稳健的测定方法,使Steelman-Pohley量化的生物测定在批量一致性上有了很大的改进。
自2007年以来,存在一个固定的2∶1的重组-人FSH(150IU)和重组-人LH(75IU)的组合。这种组合日常用于刺激严重缺乏FSH和LH女性的卵泡发育、反应不良和年龄大的女人,显示了满意的结果。因为要避免注射两个独立的注射剂,或混合的促性腺激素优于注射剂,所以2∶1配方的α-FSH和α-LH有潜在的好处。
DNA重组技术可设计出具有较高治疗活性的促性腺激素受体激动剂和拮抗剂,这通过改变关键蛋白质和碳水化合区(FSH和LH的α-和β-亚单位)来实现。FSH有一个相对较短的半衰期,hCG有相对较长的半衰期。位点突变和基因转移技术使hCGb(CTP)的羧基端延伸区融合为以30结尾的FSH编码序列并产生一个FSH类似的产品,有较长的半衰期。一个注射剂产生的活性就可以高于卵泡发育阈值,支持一周内多个卵泡的生长需求,并能诱导在IVF治疗的第一周内多个卵泡的持续发育。事实上,单独一个α-rFSH注射剂替代了连续7天每天注射的rFSH。Beckers报道了通过使用这种人rFSH嵌合长效受体激动剂(rFSH-CTP)刺激卵巢后第一例婴儿的诞生。α-rFSH的临床试验项目,包括参与、担保和其他情况,是目前ART中最大的并包含23个国家78个IVF中心2500多个患者的项目。这些试验表明,单一注射α-rFSH是安全可接受的。对于体重>60kg的患者来讲,150µgαrFSH的剂量是获得最佳卵母细胞数量的最合适的剂量。对于<60kg的女性来讲,100µg的较低剂量显示有类似的结果。