三、鸡马立克氏病
鸡马立克氏病（Marek’s Disease，MD）是由疱疹病毒引起的一种淋巴组织增生性疾病，此病的特点是病鸡的外周神经、性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤出现单核细胞浸润，并伴随麻痹和产生内脏肿瘤，它是一种淋巴瘤性质的肿瘤疾病，对养鸡业的发展危害相当严重。自1970年从火鸡身上分离出火鸡疱疹病毒FC126号病毒株，用以制成疫苗，此病得到了较好的控制，养鸡业的损失大大降低。但近几年在许多地区又出现了较大规模的流行。本病是一种世界性疾病，是危害养鸡业健康发展的三大主要疫病（马立克氏病、鸡新城疫及鸡传染性法氏囊病）之一，引起鸡群较高的发病率和死亡率。
马立克氏病病毒属疱疹病毒科马立克氏病毒属禽疱疹病毒2型。根据抗原性不同，马立克氏病毒可分为三种血清型，即血清1型、2型和3型。血清1型包括所有致瘤的马立克氏病毒，含强毒及其致弱的变异毒株；而血清2型包括所有不致瘤的马立克氏病毒；血清3型包括所有的火鸡疱疹病毒及其变异毒株。
传染源为病鸡和带毒鸡（感染马立克病的鸡，大部分为终生带毒），其脱落的羽毛囊上皮、皮屑和鸡舍中的灰尘是主要传染源。此外，病鸡和带毒鸡的分泌物、排泄物也具传染性。病毒主要经呼吸道传播。本病主要感染鸡，不同品系的鸡均可感染。火鸡、野鸡、鹌鹑、鹧鸪可自然感染，但发病极少。本病具有高度接触传染性，病毒一旦侵入易感鸡群，其感染率几乎可达100%。本病发生与鸡年龄有关，年龄越轻，易感性越高，因此，1日龄雏鸡最易感。本病多发于5～8周龄的鸡，发病高峰多在12～20周龄之间。我国地方品种鸡较易感。
（一）病毒特征
鸡马立克氏病病毒为双股DNA病毒目疱疹病毒科（细胞结合性疱疹病毒）的马立氏克病毒属，病毒颗粒直径150nm，内含直径100nm的20面体核衣壳，核衣壳内为线状卷轴样基因组，核外壳之外是脂蛋白囊膜和许多糖蛋白的小纤突，基因组由单分子线状双股DNA分子组成，大小125～235kb。
本病病原对鸡致病致瘤，主要毒株有超强毒（Md5等）、强毒（JW、GA、京1等）；血清2型，对鸡无致病性，主要毒株有SB/1和301B/1等；血清3型，对鸡无致病性，但可使鸡有良好的抵抗力，是一株火鸡疱疹病毒株（HVT-FC126株）。该病毒能在鸡胚绒毛尿囊膜上产生典型的痘斑，卵黄囊接种较好。能在鸡肾细胞、鸡胚成纤维细胞和鸭胚成纤维细胞上生长产生痘斑。完整病毒的抵抗力较强，在粪便和垫料中的病毒，室温下可存活4～6个月之久。细胞结合毒在4℃可存活2周，在37℃存活18h，在50℃存活30min，60℃只能存活1min。
（二）临床症状
鸡马立克氏病一般可分为四种类型，即神经型、内脏型、眼型、皮肤型。
神经型（古典型）：主要侵害鸡的坐骨神经和前臂神经，造成病鸡翅膀下垂、头颈歪斜和两腿劈叉，早期可见到一肢或两肢发生不完全麻痹、运动失调、步态异常（图1-12）。
图1-12 神经型鸡马立克氏病
内脏型（急性型）：主要在病鸡的心、肝、腺胃、胰腺、卵巢、脾、肺、肾或肌肉等部位发生大小不等的灰白色肿瘤。病鸡整个表现为精神沉郁，不吃食，消瘦，有的突然死亡。多在产蛋前发病且死亡率高（图1-13）。
图1-13 内脏型鸡马立克氏病
眼型：主要侵害眼睛。病鸡逐渐丧失对光线的调节能力，瞳孔收缩、变小、边缘不整齐、正常色素消失，严重时失明，只留下针尖大小的小孔，形成“灰眼病”（图1-14）。
图1-14 眼型鸡马立克氏病
皮肤型：病鸡褪毛后症状明显。可见羽毛囊呈现孤立或融合的白色结节，俗称“榴皮病”（图1-15）。
图1-15 皮肤型鸡马立克氏病
这四种类型有时单独发生，有时可同时发生。此外病鸡还出现不想吃食、下痢、贫血和进行性消瘦。鸡群发生马立克氏病后，可很快在整个鸡群蔓延传播。病鸡因运动障碍、无法采食和饮水而死亡。有的病情可延续数年，死亡率很高。
（三）病理变化
最常见的病变为坐骨神经、臂神经等单侧性肿大变粗，比正常增大2～3倍。内脏器官可能出现一个或多个肿瘤，其中以卵巢最易受害，颜色消退，肿大，表面颗粒状，病变器官可增大数倍，肿瘤切面坚实平滑。皮肤肿瘤多见于腿部、颈部和长有粗大羽毛的部位，形成肿瘤性结节。
根据病变发生的部位，可分为4种类型。
1.神经型
由于运动障碍易被发现，因此病鸡运动失调、步态异常是最早看到的症状。病变主要发生在腹腔神经丛、臂神经丛、坐骨神经丛和内脏大神经。病变神经变粗，比正常肿大2～3倍，呈灰色或黄色的水肿，纹路消失，好像在水中浸泡过一样。病变多为单侧性，很容易与另一侧对比。
2.眼型
瞳孔收缩，边缘不整齐呈锯齿状，整个瞳孔仅仅留下一个针头大小的小孔。
3.内脏型
常在肝、脾、肾、肺、腺胃、心脏、卵巢等器官形成单个或多个肿瘤。主要在各脏器内可见到肿瘤结节或弥漫性的浸润。卵巢呈菜花样肿大。
4.皮肤型
病变常浸润羽毛囊，呈孤立或融合的灰白色隆起的结节。侵入肌肉时，病变多出现于胸肌和腿肌部，形成灰白色肿瘤。
（四）流行病学特征
鸡易感，火鸡、山鸡和鹌鹑等较少感染，哺乳动物不感染。病鸡和带毒鸡是传染来源，尤其是这类鸡的羽毛囊上皮内存在大量完整的病毒，随皮肤代谢脱落后污染环境，成为在自然条件下最主要的传染来源。本病主要通过空气传染经呼吸道进入体内，污染的饲料、饮水和人员也可带毒传播。孵房污染能使刚出壳雏鸡的感染性明显增加。主要的发病在2～5月龄，2～18周龄鸡均可发病。母鸡比公鸡易感性高。来航鸡抵抗力较强，肉鸡抵抗力低。
（五）预防及治疗
本病目前无有效疗法，加强综合防制措施、免疫接种是本病最有效的防控措施。
① 加强养鸡环境卫生与消毒工作，尤其是孵化卫生与育雏鸡舍的消毒，防止雏鸡的早期感染，这是非常重要的，否则即使出壳后即刻免疫有效疫苗，也难防止发病。
② 加强饲养管理，改善鸡群的生活条件，增强鸡体的抵抗力，对预防本病有很大的作用。饲养管理不善、环境条件差或某些传染病常是重要的诱发因素。
③ 坚持自繁自养，防止因购入鸡苗的同时将病毒带入鸡舍。采用全进全出的饲养制度，防止不同日龄的鸡混养于同一鸡舍。
④ 防止应激因素和预防能引起免疫抑制的疾病，如鸡传染性法氏囊病、网状内皮组织增生病等的感染。
⑤ 对发生本病的处理。一旦发生本病，在感染的场地清除所有的鸡，将鸡舍清洁消毒后，空置数周再引进新雏鸡。一旦开始育雏，中途不得补充新鸡。
疫苗接种：
国内使用的疫苗有多种，主要是进口疫苗和国内生产的疫苗，这些疫苗均不能抗感染，但可防止发病。
（1）疫苗种类 血清1型疫苗，主要是弱毒株CV1-988和齐鲁制药厂兽药分厂所生产的814疫苗，其中CV1-988应用较广；血清2型疫苗主要有SB-1、301B/301A/1以及中国的Z4株，SB-1应用较广，通常与火鸡疱疹病毒疫苗（即血清3型疫苗HVT）合用，可以预防超强毒株的感染发病，保护率可达85%以上；血清3型疫苗，即火鸡疱疹病毒HVT-FC126疫苗，HVT在鸡体内对马立克氏病病毒起干扰作用，常1日龄免疫，但不能保护鸡免受病毒的感染；多价苗，市场上已有SB-1+FC126、301B/1+FC126等二价或三价苗，免疫后具有良好的协同作用，能够抵抗强毒的攻击。
（2）免疫程序的制订 单价疫苗及其代次、多价疫苗常影响免疫程序的制订，单价苗如HVT、CV1-988等可在1日龄接种，也有的地区采用1日龄和3～4周龄进行两次免疫。通常父母代用血清1或2型疫苗，商品代则用血清3型疫苗，以免血清1或2型母源抗体的影响，父母代和子代均可使用SB-1或301B/1+HVT等二价疫苗。
免疫失败的原因：
（1）接种剂量不当 常用的商品疫苗要求每个剂量含1500～2000以上个蚀斑形成单位，接种该剂量7d后产生免疫力。若疫苗贮藏过久或稀释不当、接种程序不合理或稀释好的冻干苗未在1h内用完，均会导致雏鸡接受的疫苗剂量不足而引起免疫失败。
（2）早期感染 疫苗免疫后至少要经1周才使雏鸡产生免疫力，而在接种后3d，雏鸡易感染马立克氏病并死亡，而且HVT疫苗不能阻止马立克氏病强毒株的感染。为此须改善卫生措施，以避免早期感染，但难以预防多种日龄混群的鸡群感染。
（3）母源抗体的干扰 血清1、2、3型疫苗病毒易受同源的母源抗体干扰，细胞游离苗比细胞结合苗更易受影响，而对异源疫苗的干扰作用不明显。为此，免疫接种时可进行下列调整：①增加HVT免疫剂量或使用其他疫苗病毒，被动抗体消失时于3周龄再次免疫接种；②对鸡不同代次选用不同血清型的疫苗，如父母代鸡用减弱血清1型疫苗，子代可用血清3型（HVT）疫苗；③多使用细胞结合HVT苗。
（4）超强毒株的存在 传统的疫苗不能有效地抵抗马立克氏病超强毒株的攻击从而引起免疫失败，对可能存在超强毒株的高发鸡群使用814+SB-1二价苗或814+SB-1+FC126三价苗，具有满意的防治效果。
（5）品种的遗传易感性 某些品种鸡对马立克氏病具有高度的遗传易感性，难以进行有效免疫，甚至免疫接种后仍然易感，为此须选育有遗传抵抗力的种鸡。
（6）免疫抑制和应激感染 鸡传染性法氏囊病毒、网状内皮组织增生病病毒、鸡传染性贫血病病毒等均可导致鸡对马立克氏病的免疫保护力下降，以及环境应激导致免疫抑制可能是引起马立克氏病疫苗免疫失败的原因。
总之，采用疫苗接种是控制本病极重要的措施，但是它们的保护率均不能达到100%，因此鸡群中仍有少量病例发生，故不能完全依赖疫苗接种，加强综合防疫措施是十分必要的。
（六）实验室检测
MD琼脂凝胶扩散试验。
依据标准：GB/T 18643—2002。
1.范围
本方法用于检测1月龄以上鸡马立克氏病的血清抗体和20日龄以上鸡羽髓抗原。
2.琼脂扩散试验
（1）材料准备
1）器材：lml注射器，6～9号针头，10×100mm小试管，直径6～8mm长约16cm的玻璃棒，微量移液器及滴头，烧杯或瓷缸，直径85mm培养皿，孔径4mm和3mm的打孔器。
2）琼脂扩散抗原，阳性血清，系冻干制品，使用时用蒸馏水恢复到原分装量。
3）琼脂凝胶平板：用含8%氯化钠的磷酸盐缓冲液（0.01mol/L，pH7.4）配制1%琼脂糖溶液，水浴加温使充分溶化后，加入培养皿，每皿约加20ml。平置，在室温下凝固冷却后，将琼脂板放在预先画好的7孔形图案上，用打孔器按图形准确位置打孔，中心孔孔径为4mm，周边孔孔径为3mm，孔距3mm。也可用7孔型打孔器打孔。小心挑出孔内琼脂，勿破坏周围琼脂，而后倒置放入4℃下保存3～5d备用。
（2）操作方法
1）检测血清抗体
① 用微量移液器分别将各被检血清按顺序在周边孔中每间隔一孔加一样品。中心孔内滴加琼扩抗原。余下的周边孔内加入标准阳性血清。各孔均以加满而不溢出为度。
② 将加样完毕的琼脂板加盖后，平放于带盖的湿盒内，置37℃温箱中，24h内观察并记录结果。
2）用阳性血清检测病毒抗原（被检鸡的羽髓浸液）
① 选含羽髓丰满的翅羽或身体其他部位的大羽数根（幼鸡8根，中、成鸡3～5根），剪下羽根部分，并按编号分别收集于相应的小试管内。
② 向每管内滴加2～3滴蒸馏水（羽髓丰满时也可不加），然后用玻璃棒挤压羽根，以适当的压力转动玻璃棒，倾斜试管，并用玻璃棒导流使羽髓浸液流至管口，另一人用加样器将其吸出，加入外周孔（被检样品加入外周2、3、5、6孔中）。
③ 向中心孔滴加标准阳性血清。
④ 向空下的1、4孔内滴加已知琼扩抗原。以上均以加满不溢出为度。
⑤ 加样完毕，操作同2.、（1）、2）。
（3）结果判定
1）被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线，并与周边已知抗原或阳性血清孔的沉淀线相互融合者，判为阳性，不出现沉淀线的则判为阴性。
2）已知抗原与阳性血清孔之间所产生的沉淀线末端弯向被检样品孔内侧时，则该被检样品判为弱阳性。
3）有的受检材料可能会产生两条以上沉淀线，其中一线与已知抗原阳性血清的沉淀线融合者仍判为阳性。